rpa技术原理
rpa技术原理:
rpa全称为:RecombinasePolymeraseAmplification,术原即重组酶聚合酶扩增。术原重组酶与引物结合形成的术原蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。术原一旦引物定位了同源序列,术原就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,术原对模板上的术原目标区域进行指数式扩增。被替换的术原DNA链与SSB结合,防止进一步替换。术原在这个体系中,术原由两个相对的术原引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,术原一般可在十分钟之内获得可检出水平的术原扩增产物。
重组酶聚合酶扩增(RecombinasePolymeraseAmplification,术原RPA),术原被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37摄氏度左右。